| 简介： |
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潘仕荣 王琴梅
(中山大学附属一院，广州，510080，E-mail:gzpanshr@163.net)
聚氨酯是一类广泛应用的医用高分子材料，为满足长期与血液相接触的要求，其抗血栓性必须进一步提高。水蛭素(hirudin)是具有与凝血酶高度特异性结合的生物物质，用重组DNA技术制备的重组水蛭素(r-hir)，在临床上用于抗凝研究。将r-hir共价结合到生物材料表面，改善抗血栓性，这是国外刚起步的工作。本文在聚氨酯表面先接枝牛血清白蛋白，再进一步偶联r-hir，最后评价了抗凝血酶活性。本研究对改善聚氨酯的抗血栓性能具有重要意义。
本研究采用的聚合物为：①聚碳酸酯聚氨酯（PU）：本实验室制备，由聚六亚甲基碳酸酯二醇、MDI、乙二胺等合成 ，溶剂为二甲基甲酰胺。②含羧基的聚碳酸酯聚氨酯（PU1）：除扩链剂用二羟甲基丙酸代替乙二胺外，其他原料同PU。③Chroroflex（简称Chro）:美国PolyMedica公司，抗凝血性能优良的聚碳酸酯聚氨酯。PU与Chro溶液在水平模具上浇注制片，片厚0.5mm。
在PU和Chro表面上先涂复PU1溶液（CPU和C-Chro）,并用次甲基蓝吸附法测定表面羧基含量；再用偶联剂EDC接枝牛血清白蛋白（CPU-BSA和C-Chro-BSA）,并通过FT-ATR-IR谱的差减测定表面BSA接枝量(Fig 2)；最后用偶联剂EDC偶联125I-rHir（CPU-BSA-125I-rHir和C-Chro-BSA-125I-rHir）,并用放射性同位素测定表面rHir的偶联量，并用部分凝血酶时间测定(KPTT)、凝血酶原时间测定(PT)、凝血酶时间测定(TT)等试验评价样品的抗凝血酶活性。
实验结果表明，CPU和C-Chro表面羧基含量分别为0.377和0303μmol/cm2，CPU-BSA和C-Chro-BSA表面BSA含量分别为42.6和26.2μg /cm2，CPU-BSA-125I-rHir和C-Chro-BSA-125I-rHir表面rHir含量分别为71.67和69.11 ng/cm2，比对照样品都有很大的提高。抗凝血酶试验评价表明，rHir偶联样品的KPTT、PT、TT时间都明显延长，它们的抗凝血酶活性确有提高，抗血栓性能得到有效的改善。
参考文献
1 Mattuew DP, Michael S, Scott AB et al, Covalent linkage of recombinant hirudin to a novel poly(carbonate) urethanes polymer with protein binding sites:determination of surface antithrombin activity, Artificial Organes,1998,22(8):657-665
2 Yoshihiro Ito, Masahiko S,Yukio I, Synthesis and antithrombogenicity of anionic polyurethanes and heparin-bound polyurethanes, J Bimed Mater Res, 1986,20(8):1157-1177
致谢
本工作得到国家自然科学基金 (30070223)资助。 |
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