简介: |
我们发展了一种高灵敏非标记的荧光生物传感器。首先,合成了一种带负电荷的二萘嵌苯探针分子,由于聚阳离子能够通过非共价相互作用力诱导探针集聚,探针的单体荧光被有效的猝灭,此时,如果向溶液中加入带负电荷的单链核酸,它能够竞争性的与聚阳离子结合导致探针分子被释放,单体荧光恢复。没有任何扩增,DNA的检测限达到2pM。基于以上的实验结果,设计了一种高灵敏检测碱性磷酸酶ALP的方法。由于A外切酶能够降解5’一磷酸化的核酸链,一条5’一磷酸化的核酸链在有ALP存在的情况下去磷酸化,再加入A外切酶不能被降解,加入到聚阳离子和探针的混合溶液中,很强的荧光能够被检测到,反之,没有ALP存在下,核酸被降解,再加到聚阳离子和探针的混合液中时,荧光不能恢复。我们的方法简单,方便,廉价并且灵敏度高,ALP的检测限达到0.02mU/mL。 |
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