项目类别：国家自然科学基金面上项目
项目编号：21374057
项目规模：75万RMB
参与人员：全体研究生
起止日期：2014/01-2017/12
在零污染背景上固定蛋白质具有重要应用意义，但目前采用的化学/物理固定 方法过程复杂，其特异性和灵敏度不能满足要求。本项目创新性地利用小分子（如 HEPES 和 TCEP）对溶菌酶特异性识别及相转变的诱导作用，研究建立溶菌酶分子在零污染背景基材表 面的直接固定方法，解决在零污染背景上固定目标蛋白质分子的关键核心难题。通过在分子 水平上研究小分子对溶菌酶特异性识别和诱导其相转变的微观进程，以及相转变产物与包括 零污染背景在内的各种表面之间的相互作用，阐明直接固定方法的作用机理。在实现溶菌酶 相转变产物与零污染背景稳定结合的基础之上，通过生物素标记或溶菌酶与目标蛋白质偶 联，研究建立一整套目标生物分子在零污染背景上直接固定的科学方法。该科学方法的建立 拟完全摒弃传统方法中对零污染背景进行重复活化和钝化的繁琐步骤，从而有效解决生物分 子表面固定中的关键问题，为从实际复杂体系中高灵敏度钩钓靶向蛋白质提供科学依据。