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皮肤角质形成细胞的无血清培养方法
writer:章培标,侯立中,侯宜
keywords:角质形成细胞;无血清培养;组织工程;人工皮肤
source:期刊
specific source:黑龙江医药, 2003,5:442-445
Issue time:2003年
[论文摘要] 目的:探索建立少量成年自体皮肤角质形成细胞体外无血清培养体系,为自体组织工程皮肤的构建与移植奠定物质基础。方法:无茵条件下,取2cm×2cm 兔耳皮肤组织块,Dispase消化,分离真表皮,表皮以胰蛋白酶+EDTA 消化获得角质形成细胞,以含钙和不舍钙的角质形成细胞培养液(K-SFM),按不同细胞密度接种于24孔板,观察细胞生长状况;免疫组化鉴定,MTT法测定不同血清浓度对角质形成细胞增殖分化的影响。结果:在适当的Ca 浓度下,少量自体角质形成细胞能够在无血清培养液k—SFM 中培养扩增,最多可传4~6代。添加血清后可明显加速细胞分化。结论:无血清培养体系适用于少量成年自体角质形成细胞的体外连续培养扩增,培养的细胞可用于自体组织工程皮肤的构建。